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磷酸钙细胞转染试剂盒使用注意事项

2024-06-27

磷酸钙细胞转染试剂盒的使用是细胞转染实验中的关键步骤,以下是使用时的注意事项:

 

1. 高纯度质粒的要求:确保使用的质粒DNA具有高纯度,通常要求A260/A280比值大于1.8,这是获得高转染效率的必要条件。

2. 细胞状态的重要性:细胞必须在良好的生长状态下进行转染,特别是在指数生长期进行转染,以实现最佳的转染效率。

3. 转染前准备:在转染前30~60分钟,吸去细胞培养液,加入新鲜的不含抗生素的无血清培养液。这有助于细胞更好地接受转染。

4. 溶液混合顺序:在制备DNA-氯化钙-HBS混合物时,注意将DNA-氯化钙溶液加入到HBS溶液中,而不是相反。这有助于形成稳定的转染复合物。

5. HBS溶液的保存:HBS溶液的pH值对转染效率至关重要,因此尽量避免将其长时间暴露在空气中,以免被空气中的CO2酸化。

6. 操作安全:在操作过程中,请遵循实验室的安全规定,穿戴实验服和一次性手套,确保实验的安全进行。

 

综上所述,遵循以上注意事项,可以确保磷酸钙细胞转染试剂盒的有效使用,提高转染效率,为细胞转染实验的成功提供有力保障。