贝博BBproExtra®丝状真菌细胞壁蛋白提取试剂盒(BB-31365)适用于从各种丝状真菌中提取细胞壁蛋白。优化的裂解液配方可以充分释放各种共价结合和非共价结合的细胞壁蛋白,提取过程简单方便。
本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白,下游应用范围广,提取液裂解细胞的能力较温和,需要根据实际样本情况优化裂解时间。
本试剂盒提取的蛋白可用于Westerm Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析Gelshift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
1.提取液制备:
配成试剂A工作液。
丝状真菌细胞壁蛋白提取液A工作液中加入蛋白酶抑制剂混合物B, 混匀后置冰上备用。
2.收集对数生长期的丝状真菌样本,用冷PBS洗涤3-5次,离心; 每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.菌体中加入上述制备好的蛋白提取液,混匀后,在振荡孵育4小时-过夜。
4.离心10分钟。
5将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到细胞壁蛋白。
6将上述蛋白提取物定量后分装于-80°C冰箱保存备用或直接用于下游实验。